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重組基因表達、RNA干擾、基因編輯等研究應(yīng)用都離不開核酸的轉(zhuǎn)染,目前,能有效將核酸轉(zhuǎn)染到哺乳動物或昆蟲細胞的方法主要有三種,分別是化學(xué)轉(zhuǎn)染、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)和電穿孔,這三種方法各有特色(詳見下表)。其中,電穿孔方法是唯一滿足既高效快速且適用各種難轉(zhuǎn)細胞的轉(zhuǎn)染方法,該方法既不受細胞類型的制約(如原代細胞研究),也沒有對基因有效荷載大小的限制,唯一缺點大概就是儀器成本普遍較高。那么問題來了,有沒有既便宜又好用的電穿孔設(shè)備呢?答案是:當然有!
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化學(xué)轉(zhuǎn)染 |
病毒轉(zhuǎn)導(dǎo) |
電穿孔 |
使用材料 |
化學(xué)試劑,如TransIT系列轉(zhuǎn)染試劑,磷酸鈣、脂質(zhì)體、聚合物等 |
病毒載體生產(chǎn)或包裝細胞系 |
電穿孔儀、電轉(zhuǎn)杯和電轉(zhuǎn)緩沖液 |
作用機理 |
化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑與核酸形成復(fù)合物,然后與細胞表面電荷相互作用,經(jīng)內(nèi)吞進入細胞 |
利用病毒載體,通過病毒感染將核酸導(dǎo)入細胞內(nèi) |
通過外加電場增加細胞膜的通透性 |
操作流程 |
在細胞中加入轉(zhuǎn)染試劑與核酸的復(fù)合物 |
先轉(zhuǎn)染細胞生產(chǎn)病毒載體,收獲和純化載體后再感染靶細胞 |
將細胞懸浮在緩沖液中并施加電脈沖 |
操作時間 |
很短 |
數(shù)天 |
很短 |
主要成本 |
化學(xué)試劑 |
時間,化學(xué)試劑 |
電穿孔設(shè)備 |
主要優(yōu)勢 |
方便 |
轉(zhuǎn)染效率高,同時滿足體外和體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo),包括休眠細胞 |
適用于難轉(zhuǎn)染的細胞 |
西美杰代理的Mirus品牌推出的Ingenio® EZporator® Electroporation System就是這么一款專為研究人員開發(fā)的簡單高效且性價比超高的電穿孔系統(tǒng),適用于多種哺乳動物細胞和昆蟲細胞的轉(zhuǎn)染,滿足基因表達、RNA干擾、穩(wěn)定細胞系構(gòu)建以及CRISPR/Cas基因編輯等應(yīng)用,為研究者提供了一種成本低且收益高的電轉(zhuǎn)染解決方案。
Ingenio® EZporator® Electroporation System
Ingenio® EZporator®電轉(zhuǎn)儀配套有專屬電轉(zhuǎn)染試劑盒Ingenio® Electroporation Kits,同樣是超高性價比之選。該試劑盒內(nèi)含電轉(zhuǎn)緩沖液與電轉(zhuǎn)杯等耗材,能在充分發(fā)揮Ingenio® EZporator®電轉(zhuǎn)儀效率的基礎(chǔ)上更好的保護細胞活性,此外,Ingenio®電轉(zhuǎn)試劑盒還是一套開源系統(tǒng),不僅適配Mirus的Ingenio® EZporator®電轉(zhuǎn)儀,還適用于市面上常見的Lonza-Amaxa®,Bio-Rad®以及Harvard BTX®等品牌的電轉(zhuǎn)儀,給已經(jīng)擁有電轉(zhuǎn)儀的客戶提供了另一種高性價比選擇。
Ingenio® Electroporation Kits
與市面上充斥的各種繁瑣復(fù)雜的儀器相比,Ingenio® EZporator®電轉(zhuǎn)儀簡直是一股清流,不僅外觀設(shè)計簡潔,就連操作也延續(xù)了一貫的極簡風格。不僅如此,Mirus的研發(fā)團隊還針對不同的細胞系進行了電轉(zhuǎn)條件優(yōu)化,提供了一套非常詳細的電轉(zhuǎn)染條件參考,使用者可以直接抄作業(yè),不需要進行復(fù)雜的電轉(zhuǎn)染條件摸索,非常貼心!
Ingenio® EZporator®電轉(zhuǎn)儀操作步驟
1. 將機器各部件連接好,在電轉(zhuǎn)杯中加入適當細胞與電轉(zhuǎn)緩沖液(參照操作手冊)。
2. 開機確認面板在“READY”狀態(tài),用電壓調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)節(jié)到適當電壓和模式(哺乳動物細胞用低壓LV模式,設(shè)置電壓條件參照操作手冊),將電轉(zhuǎn)杯放入電轉(zhuǎn)槽內(nèi)并蓋好安全蓋。
3. 按下Pulse按鈕,機器開始充電并發(fā)出電轉(zhuǎn)脈沖,此時會聽到電脈沖發(fā)出的聲音。
4. 記錄峰值電壓(Vp)和時間常數(shù)(t)。
5. 取出細胞進行正常培養(yǎng)和后續(xù)實驗。
6. 電轉(zhuǎn)程序結(jié)束后,按Pulse按鈕或者旋轉(zhuǎn)電壓調(diào)節(jié)鈕即可返回“READY”狀態(tài),然后重復(fù)上述步驟進行其他樣品的電轉(zhuǎn)操作。
不同細胞電轉(zhuǎn)染參數(shù)推薦
Ingenio® EZporator®電轉(zhuǎn)儀實驗數(shù)據(jù)
Jurkat E6-1 (A)、K562 (B)、Raji (C)和Raw 264.7 (D)細胞在不同電壓條件下使用Ingenio®電轉(zhuǎn)緩沖液和Ingenio®EZporator®電轉(zhuǎn)儀,分別用0.2cm和0.4cm電轉(zhuǎn)杯和EGFP報告基因觀察電轉(zhuǎn)效率。電穿孔后48h,用流式細胞術(shù)測定GFP陽性細胞百分比(柱狀圖)和細胞活率(點線圖)。
Ingenio®優(yōu)勢特點
- 功能:能將任何核酸分子轉(zhuǎn)染到各種類型的細胞中,包括難轉(zhuǎn)染細胞系、干細胞、原代細胞等。
- 簡單:儀器操作流程簡單,僅需一款緩沖液即可通用所有類型細胞的電轉(zhuǎn)染。
- 靈活:提供不同類型的細胞電穿孔參數(shù)參考,讓電轉(zhuǎn)染條件優(yōu)化更加簡單。
產(chǎn)品詳情
貨號 |
規(guī)格 |
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Ingenio® EZporator®電轉(zhuǎn)儀 |
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Ingenio® EZporator® Electroporation System |
MIR 51000 |
包含主機1個,電轉(zhuǎn)杯槽1個,電源線3根 |
Ingenio®電轉(zhuǎn)染試劑耗材 |
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Ingenio® Electroporation Kits (0.4 cm cuvettes and cell droppers) 電轉(zhuǎn)染試劑盒(含0.4cm電轉(zhuǎn)杯與緩沖液)熱銷款 |
MIR 50113 |
25 reactions |
MIR 50116 |
50 reactions |
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MIR 50119 |
100 reactions |
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Ingenio® Electroporation Kits (0.2 cm cuvettes and cell droppers) 電轉(zhuǎn)染試劑盒(含0.2cm電轉(zhuǎn)杯與緩沖液) |
MIR 50112 |
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MIR 50115 |
50 reactions |
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MIR 50118 |
100 reactions |
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Ingenio® Electroporation Solution 電轉(zhuǎn)染緩沖液(多平臺通用) |
MIR 50111 |
25 reactions |
MIR 50114 |
50 reactions |
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MIR 50117 |
100 reactions |
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Ingenio® Cuvettes(0.4cm電轉(zhuǎn)杯) |
MIR 50123 |
50 pk, 0.4 cm cuvettes |
Ingenio® Cuvettes(0.2cm電轉(zhuǎn)杯) |
MIR 50121 |
50 pk, 0.2 cm cuvettes |
如果您正在考慮配置一臺高性價比的電轉(zhuǎn)染系統(tǒng),不妨選擇Ingenio® EZporator®電轉(zhuǎn)儀試試吧!關(guān)注西美杰微信公眾號(微信號xmjsci),回復(fù)關(guān)鍵詞“電轉(zhuǎn)儀”,填寫表單即可申請樣機測試。樣機隨贈8次規(guī)格電轉(zhuǎn)染試劑耗材,方便您快速開啟電轉(zhuǎn)染測試!
美國Mirus公司成立于1995年,是世界上很早開發(fā)高效、低毒轉(zhuǎn)染試劑的公司,同時也是該類試劑的主要供應(yīng)商之一。其產(chǎn)品線涵蓋化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑、電轉(zhuǎn)染產(chǎn)品、病毒生產(chǎn)和轉(zhuǎn)導(dǎo)產(chǎn)品,適用于基因功能研究、蛋白生產(chǎn)、病毒載體生產(chǎn)和動物模型構(gòu)建等領(lǐng)域。Mirus被公認為轉(zhuǎn)染試劑開發(fā)的領(lǐng)跑者,其許多杰出成果獲得世界公認與廣大用戶的好評。北京西美杰科技有限公司是Mirus中國區(qū)代理,始終秉承著專業(yè)、嚴謹?shù)膽B(tài)度為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù),Mirus熱銷轉(zhuǎn)染產(chǎn)品常備現(xiàn)貨。如果您對上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電北京西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.713140.com了解更多產(chǎn)品信息。